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        離心機簡介

        概述

        離心機是全球幾乎每個生物醫學研究實驗室都使用的儀器。

        離心分離是通過離心分離復雜混合物成分的過程。

        通過以極高的速度旋轉實驗室樣品,給定混合物的成分將受到離心力,這將導致更稠密的顆粒從旋轉軸移開,而較輕的顆粒向旋轉軸移動。這些顆??梢栽诠艿牡撞砍恋沓伤^的沉淀,然后可以進一步處理或分析該分離的樣本或剩余的溶液(上清液)。
         

        離心機的組成和離心機運行的參數

        離心機的主要組成部分是轉子,轉子是高速旋轉的運動部件。

        轉子可以固定在適當的位置,或者離心機可以使用固定在稱為主軸的零件頂部的多個轉子。

        通常,離心機轉子的蓋子會擰緊,以防止樣品飛出。

        許多離心機將具有制冷單元,該制冷單元允許在旋轉過程中控制內部溫度。

        它們還具有用于輸入每次運行參數的旋鈕或按鈕,這些參數可以包括旋轉的持續時間,溫度以及旋轉的大?。ㄒ运俣然蛳鄬αΡ硎荆?。

        旋轉速度以RPM或每分鐘轉數來衡量。RPM是一個棘手的值,因為不是導致顆粒從混合物中分離出來的離心機的速度,而是作用在這些顆粒上的力。

        作用在粒子上的力與離心機轉子的半徑有關,并且由于不同的離心機具有不同的轉子尺寸,因此可以以相同的速度或RPM施加不同的力。

        離心強度也可以量化為相對離心力或RCF。RCF通常表示為地球重力加速度的倍數。

        RCF表示為轉子半徑和角速度平方除以地球重力加速度的乘積。

        RCF可以通過以下公式與RPM相關聯,其中r代表以厘米為單位的離心機半徑。

        使用此方程式可以表示失敗或成功實驗之間的差異,但是您不必對每個新過程都應用此計算。離心機通常帶有列線圖,可以很容易地將RCF轉換為RPM。使用直尺連接離心機的半徑和給定的RPM值,以獲得RCF。
         

        操作離心機

        要開始旋轉樣品,請考慮溫度。如果使用冷藏離心機,則需要在開始旋轉之前使機器內部溫度達到所需的溫度,或者您可以找到其他方法來冷卻轉子。

        即將旋轉之前,請確保已擰緊并固定了所有試管上的蓋子。

        裝入試管時,請確保每個樣品都與另一個樣品直接平衡。

        如果只有一根管子,那么再做一根可以作為配重的管子。

        如果您有三支試管,可以將它們排列成三角形,以使它們彼此等距。

        平衡離心機的重量至關重要。離心機轉子達到高速并具有大量動能。如果平衡不當,則會將整個離心機從其靜止位置推進,并造成嚴重損壞。

        一旦確認轉子和蓋子牢固,就啟動離心機并四處徘徊,直到達到所需的速度。如果您發現問題電話,并且經驗豐富的實驗室成員會來幫助您。

        離心完成后,您應該能夠在離心管底部看到沉淀的生物樣本,該沉淀與溶液的其余部分或上清液分離。

        可以通過倒出上清液(將其倒出的奇特名稱或將其吸出)來去除上清液。

        然后可以通過稱為重懸的過程將純化后的樣本返回溶液。重復離心或旋轉細胞,然后吸出細胞,然后重懸在緩沖液中,通常稱為洗滌細胞。

        應用

        既然您已經了解了離心的一些基礎知識,現在該來看看那里的某些類型的離心機以及可以執行的離心程序。

        定角轉子離心機可能是您在實驗室中會遇到的**常見的儀器類型。許多臺式離心機都屬于此類。

        這些離心機中的試管位于固定的傾斜位置,用于差分離心方案中。在這些協議中,可以使用一系列不同速度的離心來純化生物樣品,例如動物細胞。通常,這些協議涉及幾個細胞洗滌步驟。

        與定角轉子相比,回轉轉子具有可彎曲的管架,可讓樣品向外旋轉。這些轉子在密度梯度離心等應用中很有用,在該應用中,生物樣品會遷移到梯度介質的不同層。這種類型的離心分離可用于快速將一種細胞類型與另一種細胞類型分離,或用于分離單個細胞器。

        **后,超速離心機是您在實驗室中發現的所有離心機的老大哥。它可以超過70,000 rpm的轉速旋轉,非常適合分離DNA或病毒等小顆粒。

        由于該離心機的高速運行,因此應格外小心,以確保適當平衡負載,并確保轉子和蓋子均牢固。

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